クロスミキシング試験の適応と検査手順と結果解釈

APTTが延長する原因

・内因系凝固因子（凝固第VIII、 IX、XI、XII因子）活性低下：

・ループスアンチコアグラント(LA)：抗リン脂質抗体症候群

・共通系凝固因子（凝固第V, X因子、フィブリノゲン低下症）活性低下

・肝障害

・抗凝固療法，ビタミンK欠乏症䛾一部

・播種性血管内凝固（DIC）

APTT短縮

・凝固因子製剤（ノボセプンなど）を投与した検体

・ステロイド使用の検体

クロスミキシング試験の適応

凝固因子欠損やインヒビターでは治療方法が異なり鑑別が重要で、一般的に患者血漿に正常血漿を添加して補正効果をみるクロスミキシングテスト（混合試験）が行われます

PTの延長（PT-INR上昇）がみられた場合にも、クロスミキシング試験を行う場合がありますが、頻度的にはPTT延長時に行う機会の方が多いと思います。

クロスミキシング試験の検査手順

正常血漿と被験者血漿の混合血漿の作製しAPTTを測定します

１） 正常血漿調整後に速やかに測定

２） 混合後３７℃で二時間加温して測定

第Ⅷ因子インヒビターは温度、時間依存性があるため必ず2時間インキュベートします

３） 表に測定値を入力

・表は縦軸に凝固時間、横に被験者血漿混合比率（％）としてグラフを作成する

・混合比率とポイント数は０，１０，２０，５０、１００％の５点で行う

４） 視覚的に評価する

正常血漿の作製方法

プール血漿

いずれか方法で処理した健常人クエン酸Na加血漿を20名以上より採取し，プールし，正常（プール）血漿として用い小分けし-70℃以下で凍結保存する

市販正常血漿

倫理的に厳しい場合は市販の血漿を購入してください

どの正常血漿においても残存血小板数が少ないものが望ましいです

クロスミキシング試験の結果解釈

インヒビターパターン

０％から１００％を結ぶ直線に対して上に凸であればインヒビターパターンとなる

血友病患者では、凝固因子製剤の補充が行われインヒビターが発生し、中和療法がおこなわれます。このため正確なインヒビターの定量が求められます

LA 活性が凝固因子測定に影響をおよぼす場合があり、特異的な凝固因子単独よりも複数の凝固因子活性が軽度低下することが多いです。また混合直後と2 時間後の混合試験の結果を比較し，直後からAPTT 延長が認められるものはLA の可能性が高いです

凝固因子欠損パターン

０％から１００％を結ぶ直線に対して下に凸であれば凝固因子欠損パターンとなる

凝固因子欠損やインヒビターでは治療方法が異なってきますので正確な計測が要求されます。また保険収載（100点）されている検査項目ですので、算定漏れがないよう注意が必要です。

引用

・金沢大学 血液・呼吸器内科ホームページ

・「凝固検査標準化䛾現状」 クロスミキシングテスト ー 標準化における課題と現状 ー

・Clinical Question 2017年3月20日 J Hospitalist Network資料